应用噬菌体表面展示技术筛选肝细胞p53启动子结合蛋白 |
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应用噬菌体表面展示技术筛选肝细胞p53启动子结合蛋白 收藏此文
全部作者 ： 吴顺华 郑玉建 钟彦伟 成军 张跃新
第一作者单位 ： 新疆医科大学公共卫生学院劳动卫生与环境卫生学教研室
论文摘要 ： 目的 筛选p53启动子结合蛋白，探讨p53对肝细胞调节的分子生物学机制。 方法 应用噬菌体表面展示技术，以p53作为固相筛选分子，对噬菌体人肝细胞cdna文库进行5轮“吸附-洗脱-扩增”过程，经噬斑的pcr扩增后，构建克隆载体，最后对所筛选克隆进行dna测序和生物信息学分析。 结果 噬菌体经5轮富集后，成功构建了噬菌体p53展示文库，该文库包含与p53结合的肝细胞蛋白有17种。其中2个克隆编码未知功能蛋白；其余的克隆分别编码人α2hs糖蛋白(ahsg)、人d4,锌指蛋白家族2(dpf2)、凋亡反应锌指基因(req)、Ⅰ型纤溶酶原激活物抑制因子结合蛋白、氨基甲酰磷酸合成酶1、磷酸化酶激酶、酪氨酸氨基转移酶、酪蛋白激酶细胞周期素激酶、谷胱甘肽过氧化物酶、组蛋白结合蛋白3、跨膜蛋白2、血清粘蛋白2、有核红细胞白血病病毒癌基因2、毛细管扩张失调症突变基因等蛋白，涉及到细胞发育和代谢、细胞外基质、细胞周期调控、信号转导、细胞凋亡以及原癌基因等方面。结论 p53启动子dna在肝细胞具有结合多种类型和功能蛋白的作用。
关键词 ： 噬菌体表面展示技术；p53启动子；肝细胞
发表日期 ： 2007年11月20日
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