odd调节hsv-tk／gcv对乏氧环境宫颈癌hela细胞特异杀伤作用的研究 |
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odd调节hsv-tk／gcv对乏氧环境宫颈癌hela细胞特异杀伤作用的研究 收藏此文
全部作者 ： 刘磊 方艳秋 许淑芬 严丽 谭岩
第一作者单位 ： 吉林大学第一医院
论文摘要 ： 目的 构建一种由氧依赖降解结构域（oddd）调控的单纯疱疹病毒胸苷激酶(hsv-tk)基因表达的真核表达载体，观察oddd能否使hsv—tk／gcv系统对乏氧环境中的宫颈癌hela细胞有特异杀伤作用。方法 rt-pcr从hela细胞中钓取oddd 片段，将其克隆入荧光报告载体pegfp-c1，构建pegfp-oddd；扩增hsv—tk基因，将其克隆入pegfp-oddd和pegfp-c1的下游，构建pegfp-oddd-tk及pegfp-tk。将pegfp-oddd转染入hela细胞，流式细胞术检测在乏氧(o2浓度为1％)和常氧(o2浓度为21％)条件下细胞中egfp表达强度。以gcv处理转染pegfp-oddd-tk或pegfp-tk的hela细胞，mtt法检测gcv对培养细胞的杀伤效果。结果 经酶切分析、pcr和dna序列测定证实，构建了含有oddd序列调控的hsv-tk真核表达载体；含有oddd片段荧光报告载体的hela细胞在常氧浓度下egfp的表达量为11.96％低于乏氧条件下的39.92％；在乏氧环境下，转染pegfp-oddd-tk的hela细胞对gcv的敏感性高于常氧含量组(p
关键词 ： 缺氧，hela细胞，氧依赖降解结构域，单纯疱疹病毒胸苷激酶，绿色荧光蛋白
发表日期 ： 2007年12月30日
同行评议 ： （暂时没有） 综合评价：
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