天蚕素 a - 蛙皮素杂合肽基因突变体的构建及其表达 |
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天蚕素 a - 蛙皮素杂合肽基因突变体的构建及其表达 收藏此文 全部作者 : 冯惟萍 韩跃武 任慧子 陈建国 第一作者单位 : 兰州大学基础医学院生物化学与分子生物学研究所 论文摘要 : 目的 用pcr定点突变法构建天蚕素 a(1~8)- 蛙皮素(1~12)杂合基因抗菌肽( ca-ma 杂合肽)突变体,并在大肠杆菌中融和表达。 方法 采用 pcr 体外定点突变技术,设计一对方向相反的引物,其中一个引物引入突变点,应用高保真的 polybest dna 多聚酶进行重组表达质粒 pgex-4t-1-ca-ma 的 pcr 扩增,使 ca-ma 杂合肽第 16 位密码子由 agt 变为 tgg ,将扩增片段自身连接,构建 ca-ma 杂合肽突变重组表达质粒,克隆入工程菌 e.coli bl21 中表达其突变肽 w16-ca-ma。 结果 dna 测序结果表明在预期位点发生突变,突变体在大肠杆菌中高效表达。 结论 获得突变肽 w16-ca-ma,该基因的成功表达为进一步研究其抗病毒活性、抗病毒机理及结构-功能研究打下基础。 关键词 : 天蚕素a-蛙皮素杂合肽;聚合酶链反应;定点突变;融和表达 发表日期 : 2008年01月17日 同行评议 : (暂时没有) 综合评价: 天蚕素 a - 蛙皮素杂合肽基因突变体的构建及其表达 来自: 免费论文网www.paper800.com
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