大肠杆菌表达的重组人粒细胞集落刺激因子的溶解和复性并同时纯化 |
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大肠杆菌表达的重组人粒细胞集落刺激因子的溶解和复性并同时纯化 收藏此文
全部作者 ： 王超展 王骊丽 耿信笃
第一作者单位 ： 西北大学合成与天然功能分子化学教育部重点实验室，西北大学现代分离科学研究所，现代分离科学陕西省重点实验室，西北大学化学系
论文摘要 ： 对大肠杆菌表达的包涵体形式的重组人粒细胞集落刺激因子(rhg-csf)进行了溶解和纯化。研究了ph和脲对rhg-csf包涵体溶解的影响，结果表明包涵体中存在着静电和疏水作用。用多种含有还原型/氧化型谷胱甘肽(gsh/gssg)的变性剂溶解rhg-csf包涵体，比较了每一种变性剂的溶解效果，研究了每种溶解方法所得rhg-csf在高效疏水色谱中的色谱行为(hphic)。在gsh/gssg存在下用2% sarkosyl溶解的rhg-csf包涵体可能有助于氧化rhg-csf以形成二硫键，但是溶液中的sarkosyl严重干扰了色谱过程。将2% sarkosyl和8.0 moll-1脲结合起来用于rhg-csf包涵体的溶解能够很好地克服这一问题，用hphic对所得到的溶解的rhg-csf进行了复性并同时纯化，所得rhg-csf的比活性为1.9 × 108 iumg-1，纯度为97%，质量回收率为41%。
关键词 ： 重组人粒细胞集落刺激因子，包涵体，溶解，蛋白折叠，纯化
发表日期 ： 2008年01月06日
同行评议 ： （暂时没有） 综合评价：
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